新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）是一种在早产儿中常见且致命的肠道疾病，但其发病机制尚未完全明了。近期发表在《Immunity》上的一项研究揭示了胆汁酸受体FXR在NEC发展的分子机制中扮演的关键角色，并提出了潜在的治疗靶点。本文将为您深入解析该研究的核心技术、实验设计及结论。

一、核心实验技术概览

该研究结合了多组学技术与尖端分子生物学手段，对科学假设进行层层验证：

1. 使用单细胞RNA测序(scRNA-seq)分析NEC小鼠的肠道上皮细胞(IECs)转录组异质性，确立了FXR在肠细胞中的特异性高表达。
2. 通过流式细胞术和分选检测了IECs中FXR蛋白的表达，并分选出ILC3细胞进行功能分析。
3. 设计多重荧光免疫组化(mIHC)实验，分析FGF19和FXR与脂质过氧化的共定位情况，揭示NEC患者肠道中FXR与氧化损伤的时空关系。
4. 通过脂质组学(LC-MS/MS)定量分析磷脂过氧化物(PE-PUFAs)，证实FXR通过上调ACSL4促进铁死亡。
5. 构建肠道特异性FXR敲除小鼠（Fxr^AlEC），结合NEC诱导模型进行实验。
6. 通过染色质免疫沉淀(ChIP)和荧光素酶报告验证FXR直接结合ACSL4启动子，调控其转录活性。

二、样本分组逻辑

本研究通过临床队列与动物模型进行双向验证：

1. 临床样本NEC组：收集6例手术确诊的NEC患者（血浆及肠道组织）。对照组则为6例年龄匹配的非NEC患者（在先天性肠道畸形手术中取正常肠段）。
2. 小鼠实验则按基因型分组：Fxr^AlEC（肠道FXR敲除）与Fxr^fl/fl（野生型对照），并设定干预分组，使用FXR调控剂Fexaramine和拮抗剂Gly-β-MCA，以及铁死亡的抑制剂Liproxstatin-1、ACSL4抑制剂PRGL493，同时进行菌群干预。

三、颠覆性结论

1. FXR是NEC的关键驱动因子：NEC患儿肠道中FXR表达显著增高，且与血浆FGF19（FXR下游靶标）成正相关，提示FXR激活加重了病情。
2. 微生物-上皮细胞互作失衡：NEC相关的菌群失调减少了短链脂肪酸（SCFAs，如丁酸），解除对FXR的抑制，导致肠上皮细胞出现铁死亡。
3. 铁死亡-ILC3轴加重炎症：FXR通过转录激活ACSL4，促进脂质过氧化和铁死亡；死亡的上皮细胞释放的氧化磷脂（PEox）抑制ILC3分泌IL-22，从而削弱肠道屏障的修复能力。
4. 治疗新策略：靶向抑制肠道FXR、ACSL4或铁死亡显著减轻了小鼠的NEC症状，提高了生存率超过50%。

四、临床转化启示

1. 诊断标志物：血浆FGF19与脂质过氧化物（LPO）可能成为NEC的早期预警指标。
2. 治疗方向：开发针对肠道FXR的拮抗剂（如Gly-β-MCA）或铁死亡抑制剂，结合益生菌或丁酸调控菌群。

总结而言，本文研究首次揭示了FXR-铁死亡-ILC3轴在NEC中的核心作用，为理解肠道炎症的分子机制提供了新视角，并为临床干预提供了精准的靶点。通过多组学技术与跨物种模型的结合，彰显了转化医学研究的强大潜力。

尊龙凯时将继续致力于推动生物医疗领域的创新，为研究者提供更多高质量的实验产品与服务。